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Techniques de procréation Médicalement Assistée

 

Les Inséminations intra utérines : IIU  

 

Les principes de l'IIU

Le premier principe de cette technique est le rapprochement des deux gamètes mâle et femelle. En effet l’insémination intra utérine des spermatozoides a lieu au moment de l’ovulation qui aura été déclenchée 36 heures auparavant par une injection de gonadotrophine chorionique.

Le deuxième principe est de passer le premier obstacle rencontré par les spermatozoïdes qui est la glaire cervicale.

Le troisième principe est d’augmenter la fraction de spermatozoïdes dits « fléchants » à inséminer et de permettre l’activation des spermatozoïdes (la capacitation).

 

Les indications

Glaire cervicale insuffisante qualitativement et quantitativement, tests post coïtaux négatifs ou positifs faibles.



Indications masculines.
1. Oligo/asthéno/teratospermie : ce n’est certainement pas la meilleure indication d’IIU. L’orientation vers une IIU dans ce cas comme d’ailleurs dans tous les autres ne se fait qu’après interprétation d’un test de migration survie récent. L’insémination intra utérine peut être réalisée quand ce test permet de prévoir l’insémination d’au moins 1 million de spermatozoïdes en trajet direct. 
R. Wainer et al. Hum. Reprod. 2004
Il est certainement astucieux d’étudier également le taux de formes anormales après test de sélection des spermatozoïdes.
R. Wainer et al. Hum. Reprod. 2004
2. Éjaculation rétrograde

 

Insémination intra utérine avec sperme de donneur

Infertilité immunologique avec présence d'auto anticorps anti-spermatozoïdes

Infertilité d'origine inexpliquée 

 

Les résultats

 

Taux de grossesses Indications
Infécondités cervicales 16 %
Causes multiples 12 %
Infécondités masculines 11,6 %
Infécondités idiopathiques 11,3 %
Dysovulation 7,4 %

Les résultats sont variables d’un couple à l’autre. Les statistiques globales annoncent des résultats d’environ 15-16 %.

 

La Fécondation In Vitro : FIV ou FIVETE  

Qu'est-ce que la FIV ?

La fécondation in vitro (FIV) reproduit au laboratoire la fécondation et les premières phases du développement embryonnaire et permet la réalisation In Vitro des étapes qui se déroulent normalement dans les trompes : rencontre des ovocytes et spermatozoïdes (fécondation) et formation de l’embryon aux premiers stades du développement.

Plusieurs phases sont nécessaires :

  • Phase 1 : Quelle que soit l'étiologie de l'hypofertilité, la stimulation de la croissance folliculaire est nécessaire. La maturation de plusieurs follicules ovariens doit être contrôlée par : - des dosages hormonaux (Estradiol, LH et Progestérone) - des examens échographiques (taille, nombre et aspect des follicules).

  • Phase 2 : Déclenchement de la maturation finale des ovocytes par une injection de gonadotrophines chorioniques (hCG).

  • Phase 3 : Prélèvement des ovocytes par ponction des follicules sous échographie avant l'ovulation.

  • Phase 4 : Recherche des ovocytes dans les liquides folliculaires.

  • Phase 5 : Obtention d'embryons soit par FIV conventionnelle, soit par micro-injection de spermatozoïdes (ICSI) :
    La FIV conventionnelle 
    : ses indications traditionnelles sont représentées par les infertilités d’origine féminine et les hypofertilités masculines peu sévères. On utilise les spermatozoïdes de l’éjaculat, qui ont été recueillis par masturbation, puis traités au laboratoire, et mis en présence des ovocytes dans le but d’obtenir " in vitro " une fécondation, puis les premières divisions de l’œuf.
    La micro-injection ovocytaire de spermatozoïdes (ICSI) :  ses indications traditionnelles sont représentées par les hypofertilités masculines sévères. On utilise les spermatozoïdes de l’éjaculat lorsque cela est possible. Dans certains cas, il n’y a pas de spermatozoïdes dans le sperme (on parle d’azoospermie) et on doit alors les prélever chirurgicalement dans les voies génitales masculines, parfois le testicule.  Un spermatozoïde est alors micro-injecté dans chaque ovocyte arrivé à maturité, au moyen d’une micropipette.

  • Phase 6 : Le transfert embryonnaire dans la cavité utérine est réalisé 2, 3 ou 5 jours après la ponction d'ovocytes.

  Schéma récapitulatif

 

Que se passe-t-il au laboratoire ?

Le jour de la ponction ovocytaire (J0)

Pour l'ovocyte

La recherche de l’ovocytes s’effectue follicule par follicule à l’aide d’une loupe binoculaire. Il est ensuite transféré dans une boîte de culture portant votre nom, contenant un milieu nutritif. Chaque ovocyte est placé dans un incubateur à 37°C et dans des conditions physico-chimiques optimales.

recherche de l'ovocyte dans son cumulus à la loupe binoculaire

 

Pour les spermatozoïdes

Le conjoint effectue son recueil de sperme par masturbation. Une abstinence sexuelle est recommandée pendant les trois jours précédant la ponction ovocytaire. En pratique, on élimine le plasma séminal, et on sélectionne les spermatozoïdes les plus mobiles par des techniques physico-chimiques.

Cas où une fécondation in vitro conventionnelle est réalisée (FIV classique) :

Chaque ovocyte est  mis en présence d’un nombre suffisant de spermatozoïdes mobiles avant d’être replacé à 37°C dans l’incubateur.

La fécondation, qui débute par l’union d’un spermatozoïde avec l’ovocyte, s’achève en une journée par la réunion des chromosomes  maternels et paternels.

 

Cas où une micro-injection intra-ovocytaire de spermatozoïdes est réalisée (ICSI) : 

 

Les ovocytes doivent être débarrassés des cellules qui les entourent (corona radiata). Pour cela, ils sont placés dans un milieu contenant des enzymes destinées à disperser ces cellules. C’est l’étape de " décoronisation ", qui est ensuite parachevée, au moyen de pipettes très fines. A ce stade, on peut faire le tri entre les ovocytes matures et immatures. Seuls les premiers sont fécondables et pourront être micro-injectés :

pour cela, ils sont placés dans une boite de culture, sous un microscope équipé de micromanipulateur. Un spermatozoïde, qu’on choisit initialement mobile, pour être sûr qu’il soit vivant, est micro-injecté dans chaque ovocyte. 

 

Le 1er jour arpès la ponction : observation de la fécondation (J1)

 

Le lendemain de la ponction (J1), on transfère les œufs dans un nouveau milieu nutritif dépourvu de spermatozoïdes. A ce stade, on regarde au microscope si la fécondation a eu lieu ou non. On vous demande de contacter les secrétaires du centre de PMA (04.76.54.70.05). 

En moyenne, seulement la moitié des ovocytes inséminés in vitro ou micro-injectés deviennent des embryons (ou plus exactement oeufs fécondés). Il peut arriver qu’il n’y ait aucun embryon. L’ensemble de l’équipe biologique et clinique vous rencontrera pour essayer d’expliquer cet échec et envisager des solutions.

ovocyte fécondé
(ou zygote) avec présence de deux pronucléi

 

Le 2ème jour après la ponction : observation des embryons (J2)

Le 3ème jour après la ponction : transfert embryonnaire (J3)

embryon à 2 cellules embryon à  cellules

Le transfert du ou des embryons est un acte simple, non douloureux et est réalisé à la clinique Belledonne. Le ou les embryons sont introduits dans un tube fin (cathéter) en plastique, puis déposés dans la cavité utérine après passage du col.

La décision concernant le nombre d’embryons transférés (en moyenne moins de 2 embryons transférés) ainsi que le stade du transfert sera prise lors de la rencontre avec l’équipe. Toutefois cette attitude peut éventuellement être redéfinie avec le couple en fonction du contexte.

Les embryons non transférés pourront, avec l'accord du couple, être congelés si leurs caractéristiques leur permettent. En pratique, environ 20 % des tentatives de Fécondation In Vitro aboutissent à une congélation des embryons surnuméraires. Il ne faut donc pas s’étonner si tous les embryons restants, dits " surnuméraires ", ne peuvent être congelés. Le choix des embryons à congeler se fait en fonction des caractéristiques morphologiques et des critères évolutifs de ceux-ci. Actuellement dans notre centre nous attendons J5 ou J6 pour congeler les embryons surnuméraires ce qui nous permet dans 95 % des cas de pouvoir effectuer un transfert lorsque nous effectuons la décongélation de ces embryons  

 

La maturation ovocytaire In Vitro  

Cette technique est actuellement en cours d’évaluation et ne peut se faire en France que dans le cadre de protocoles de recherche.

Le but de cette technique est de ponctionner les ovocytes à un stade précoce et effectuer la maturation ovocytaire in vitro puis une Fécondation In vitro.

Le premier intérêt majeur de cette technique est de limiter la prise médicamenteuse au strict minimum. Cette pratique est assez répandue dans les pays nordiques car les patientes recherchent une technique moins médicalisée.

Le deuxième intérêt est de limiter les hyper-stimulations (HSO). Il convient donc dans un premier temps de dépister les patientes présentant un risque élevé d'HSO pour leur proposer ensuite cette technique.

La stimulation ovarienne étant très limitée il convient d’aller ponctionner les ovocytes à un stade précoces pour en avoir un nombre suffisant. La maturation des ovocytes se fait in vitro, puis la Fécondation In Vitro peut avoir lieu. Le stade ultime de cette technique est le transfert d’embryons in utero.  

 

IMSI (Intracytoplasmic Morphological Sperm Injection)  

 

 

 
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